几种酶的比较及限制酶
1几种酶的比较
(1)限制性内切酶:作用于DNA分子,切割磷酸二酯键,形成黏性末端或平末端。
(2) DNA连接酶:作用于DNA分子片段,mRNA切割酶,连接磷酸二酯键,形成重组DNA分子。
(3) DNA聚合酶:作用于脱氧核苷酸,连接磷酸二酯键,形成新的DNA分子。
(4)解旋酶:作用于DNA分子,作用于氢键,形成DNA分子的单链。
2.限制酶:
(1)一种限制酶通常只识别一种特定的碱基序列,但是有少数限制酶却可以识别不止
一种碱基序列。
(2)不同限制酶也可以识别同-碱基序列;
(3)不同限制酶识别的碱基序列虽然不同,但切出的末端也可能相互连接。
限制性酶切分析法
限制性酶切分析法是指基因组或一段核酸用限制性内切酶消化产生的片段经电泳等方法分离形成特别的条带图谱,对DNA序列的特征进行的分析。限制性酶是生物体内能识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶,即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力,但对自己的DNA却无损害作用。
限制酶是基因工程中所用的重要切割工具。科学家已从原核生物中分离出了许多种限制酶,并且已经商品化,在基因工程中广泛使用。根据限制酶切割的特点,可将它们分为两大类:一类是切割部位无特异性的;另一类是可特异性地识别核苷酸序列,即只能在一定的DNA序列上进行切割。
限制酶有什么作用?
在DNA重组技术中,限制酶主要用于:
1.在特异位点上切割DNA,产生特异的限制酶片段;
2.建立DNA分子的限制酶图谱;
3.构建基因文库;
4.用限制酶切出的相同的粘性末端,以便重组。
5.许多细菌用切割外来DNA的方法进行自我保护,如切割感1染性噬菌体的DNA.这些细菌产生一种能切割DNA的核酸内切酶,一旦发现外来DNA便将其切割,因此它们有效地限制了噬菌体对细菌的感1染,故这种核酸内切酶被称为限制酶.
6.每种限制酶特异识别专一DNA序列,并在切割位点将其准确切割.
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