植物细胞培养
⑴光照：离体培养的植物细胞对光照条件不甚严格，因为细胞生长所需要的物质主要是靠培养基供给的。但光照不但与光合作用有关，而且与细胞分化有关，例如光周期可对性细胞分化和开花调控作用，所以以获得植株为目的的早期植物细胞培养过程中，光照条件特别重要。以植物细胞离体培养方式获得重要物质，如medicine的过程，植物细胞大多是在反应器中悬浮培养。
⑵激1素：植物细胞的分裂和生长特别需要植物激1素的调节，促进生长的生长素和促进细胞分裂的分裂素是基本的激1素。植物细胞的分裂，生长，分化和个体生长周期都有相应的激1素参与调节。和动物细胞相比，植物细胞离体培养对激1素要求的原理已经了解，其应用技术也已相当成熟，已经有一套能使用的培养液。同时解决了植物细胞对水、营养物、激1素、渗透压、酸碱度、微量元素等的需求。
营养条件
1．培养基细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质，包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求，有多种合成培养基可供选择，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。
2．其他添加成分在各种合成培养基提供基础营养物质之外，还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他成分，如血1清、因子等。
血1清提供的是细胞外基质、生长因子和转铁蛋白等重要物质，常用的是胎牛血1清。要根据不同的细胞和不同的研究目的决定添加血1清的比例。10%～20%的血1清能维持细胞较快的生长增殖速度，称为生长培养液；为维持细胞缓慢生长或不死，添加2%～5%的血1清即可，称为维持培养液。但血1清中也存在有害于细胞生长和繁殖的物质，如补体、免1疫球蛋白和一些生长抑制因子；成分不明确，影响对结果的分析；不同动物、不同批次的血1清活性差别较大，影响培养效果的稳定性。
谷氨酰胺是细胞生长重要的氮源，在细胞生长代谢过程中起重要作用，但由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定容易降解，4℃下放置7天即可分解约50%，故谷氨酰胺需在使用前添加。
细胞传代
细胞密度达到80%~90%时．去培养基，10ml PBS清洗2次。加入3ml含0．25%EDTA的胰蛋白酶，放人细胞培养箱3min。加人1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化，慢病毒，转移至15ml离心管。
加入10ml PBS清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmX2min，弃上清液。再加入10ml PBS（经高压灭菌，保存于40C），吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。
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